Инвитро соскоб кожи головы

Инвитро соскоб кожи головы thumbnail

Метод определения
Гистологическое исследование биоптатов кожи (окрашивание гематоксилин-эозином) с морфологическим описанием и оценкой согласно гистологической классификации ВОЗ.

Исследуемый материал
Биоптат кожи, фиксированный в забуференном 10% растворе формалина

Гистологическое исследование биоптатов кожи при наиболее тяжелых и распространенных заболеваниях, трудно поддающихся лечению из-за неясности пато- и гистогенеза многих из них (аллергические заболевания кожи, болезни обменного характера, генетически детерминированные заболевания, неинфекционные эритематозные, эритематозно-сквамозные и папулезные болезни, везикулобуллезные (везикулопустулезные) болезни, сосудистые поражения, болезни соединительной ткани, гранулематозные, инфекционные, вирусные и паразитарные болезни кожи). 

В диагностике неонкологических болезней кожи большое значение имеет морфологическое (патогистологическое) исследование. Известно более тысячи неопухолевых заболеваний кожи, многие из которых, сходные по клиническим проявлениям, имеют разную этиологию и морфологическую картину. Биопсийное исследование дает возможность диагностировать заболевание на разных этапах его развития, определить стадию процесса, форму той или иной болезни. 

Гистологическое исследование в дерматологии имеет свои методологические границы. В части случаев установить точный диагноз при морфологическом исследовании биоптата невозможно. Лишь немногие дерматозы, кроме опухолей, имеют характерное (специфичное) гистологическое строение. Чаще гистологическая картина позволяет только предполагать той или иной диагноз, а может быть совершенно неспецифичной. 

Значение гистопатологического исследования часто заключается в подтверждении клинического диагноза или исключении тех дерматозов, диагностика которых основывалась на клинической картине заболевания. 

Наибольшие трудности встречаются при гистологическом исследовании большой группы неинфекционных воспалительных дерматозов. При чешуйчатом и красном плоском лишае, красной волчанке гистологические изменения обычно специфичны, однако гистологический диагноз может быть только предположительным. При розовом лишае и парапсориазе гистологические изменения всегда неспецифичны. В случаях инфекционных заболеваний (глубокие микозы, туберкулез, сифилис) клинический диагноз может быть установлен только после применения более точных (ПЦР, иммунофлуоресценция) дополнительных методов определения возбудителя. 

Сочетание клинических и морфологических данных делает клиническую диагностику возможной даже в тех случаях, когда изменения в структурах кожи не являются характерными. 

Наиболее информативное гистологическое исследование возможно при получении патологоанатомом детальных клинических данных, включая дифференциальный диагноз и фотографии пораженного очага. Важно корректно провести биопсию пораженного очага. Гистологическое исследование полностью развившегося патологического элемента более информативно, чем исследование свежего или развивающегося элемента. Как правило, не рекомендуется включать нормальную ткань в участок биопсии (У.Ф. Левер, 2014) – многие дерматозы характеризуются гистологическими изменениями нижней части дермы и подкожной жировой ткани. Если на коже имеется несколько типов высыпных элементов, для точного гистологического диагноза целесообразно исследовать все. 

Первый этап диагностики любого поражения кожи включает анализ анамнеза, симптомов, возникновения и течения заболевания, его продолжительности, локализации патологических изменений и других факторов экзогенного или эндогенного характера, в том числе эндокринных, обменных, нервных и иммунных нарушений. Большое значение имеют данные о давности заболевания, сезонности и склонности к рецидивам. 

Пребывание больных в эндемичных районах позволяет установить диагноз инфекционных дерматозов (лейшманиоза, лепры, тропических трепонематозов и др.); работа с животными позволяет заподозрить глубокую трихофитию, сибирскую язву. Контакт с неблагоприятной профессиональной средой (углеводороды, химические соединения) обусловливает возникновение профессиональных дерматитов, экземы, меланодермий.

Литература

  1. Буллезные дерматозы (вопросы клинико-морфологической диагностики иморфогенеза по данным электронной и атомносиловой микроскопии). Под ред. В.И. Прохоренкова, А.А. Гайдаша, Л.Н. Синицы. — Красноярск: ООО «ИПЦ «КАСС». 2008;188. 
  2. Грэхем-Браун Р., Бурк Д., Канлифф Т. Практическая дерматология. Пер. с англ. под ред. Н.М. Шаровой. — М.: Изд. «МедПресс-информ». 2011:360. 
  3. Дерматовенерология. Национальное руководство. Под ред. Ю.К. Скрипкина, Ю.С. Бутова, О.Л. Иванова. — М.: Изд. «ГЭОТАР-Медиа». 2011:1024.  
  4. Клиническая дерматовенерология: в 2-х т. Под ред. Ю.К. Скрипкина, Ю.С. Бутова. — М.: Изд. «ГЭОТАР-Медиа». 2009. 
  5. Самцов А.В. Акне и акнеформные дерматозы: монография. — М.: Ют-Ком. 2009:288. 
  6. Цветкова Г.М., Мордовцева В.В., Вавилов A.M., Мордовцев В.Н. Патоморфология болезней кожи. — М.: Изд. «Медицина». 2003:496. 
  7. Elder D.E. et al. Lever’s Histopathology of the Skin. 11th edition. 2014:1544.
Читайте также:  Дрожжи на коже головы

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток кожи

Выявление ДНК вируса Varicella-Zoster в соскобе эпителиальных клеток кожи используется для диагностики типичных, атипичных и стертых форм VZV-инфекции, для проведения дифференциальной диагностики с другими заболеваниями, сопровождающимися везикулезной сыпью, у беременных, новорожденных, детей и взрослых, в том числе и ВИЧ-инфицированных.

Вирус Варицелла-Зостер или вирус герпеса 3-го типа (Varicella-Zoster virus, VZV или Human Herpesvirus 3, HHV3) – высоко контагиозный вирус семейства Herpesviridae. Вирус при первичном инфицировании вызывает ветряную оспу (ветрянку), при реактивации – опоясывающий лишай или герпес. Передается от человека человеку воздушно-капельным и контактным путем, также возможна транспланцентарная передача вируса от матери плоду (в случае ветрянки). Наибольшее число заболеваний регистрируется в холодное время года (осенне-зимняя сезонность).

Ветряная оспа – это острое вирусное заболевание, сопровождающееся умеренной лихорадкой и симптомами интоксикации, поражением кожи и слизистых оболочек в виде пятнисто-папулезно-везикулезной сыпи. 

Вирус проникает в организм человека через верхние дыхательные пути, где он фиксируется на клетках слизистой оболочки и внедряется в них. В клетках слизистой дыхательных путей происходит первичное размножение и накопление вируса. Затем вирус попадает в лимфатическую систему и в конце инкубационного периода проникает в кровь и разносится по всему организму. Возникает вирусемия. Обладая тропностью к эпителию кожи и слизистых оболочек, возбудитель фиксируется в эпителии поверхностного слоя кожи. 

Больной ветряной оспой заразен за сутки до появления высыпаний, весь период высыпаний и 3-5 дней после появления последних пузырьков. 

Болеют преимущественно дети дошкольного возраста, обычно посещающие дошкольные учреждения. Несмотря на то, что частота заболевания ветряной оспой у взрослых меньше, чем у детей, у взрослых чаще развиваются такие осложнения, как пневмонии, энцефалиты, гепатиты; уровень летальности небольшой. При заражении в первой половине беременности возможно внутриутробное поражение плода и возникновение пороков развития. При заболевании ветряной оспой непосредственно перед родами (за 4 дня и менее) возможно развитие тяжелой формы ветряной оспы у новорожденного, поскольку трансплацентарных материнских антител у него нет. При заболевании ветрянкой более чем за 4 суток до родов образовавшиеся и прошедшие через плаценту материнские антитела хоть и не защищают ребенка от инфекции, но предотвращают ее тяжелое течение. При отсутствии иммунитета у матери и при контакте с больным ветряной оспой могут заболеть и новорожденные дети. Обычно к 14-15 годам жизни ветряной оспой уже переболевает от 70 до 90% населения. После перенесенного заболевания остается пожизненный иммунитет. Повторные заболевания ветряной оспой встречаются редко.

Опоясывающий герпес (опоясывающий лишай) – это спорадическое вирусное заболевание кожи и нервной ткани, характеризующееся воспалением кожи (с появлением преимущественно пузырьковых высыпаний на фоне эритемы в области дерматома) и нервной ткани (задних корешков спинного мозга и ганглиев периферических нервов). 

Вирус Varicella-Zoster сохраняется в организме человека в латентном состоянии, локализуясь преимущественно в ганглиях тройничного нерва и спинномозговых ганглиях чувствительных корешков грудного отдела спинного мозга. В ряде случаев при ослаблении организма (стресс, травма, интоксикация, хронические заболевания и др.) через много лет может возникнуть активация вируса с проявлениями опоясывающего герпеса, причем наличие в крови антител класса IgG не защищает от реактивации инфекции. 

Клиническая картина опоясывающего герпеса складывается из кожных проявлений и неврологических расстройств. В типичных случаях начинается как инфекционный процесс – с симптомов общей интоксикации, недомогания, слабости, утомляемости, лихорадки, тошноты, рвоты, лимфаденопатии, изменений в ликворе (в виде лимфоцитоза и моноцитоза). Далее появляются резко выраженные боли невралгического характера в области пораженного дерматома, в которой затем отмечается появление высыпаний.

Читайте также:  Краска для волос не раздражающая кожу головы

В группе риска находятся люди: 1) переболевшие в детском возрасте ветряной оспой; 2) инфицированные ВИЧ; 3) у которых была пересадка костного мозга; 4) имеющие лейкозы или лимфомы; 4) после химиотерапии и лечения системными глюкокортикостероидными препаратами; 5) пожилые. 

У ряда больных может наблюдаться атипичное течение опоясывающего герпеса, проявляющееся либо отсутствием пузырьков (абортивная форма), либо появлением пузырьков в виде пузырей (буллезная форма) с геморрагическим содержимым (геморрагическая форма) или с образованием после вскрытия пузырей темного струпа (гангренозная, некротическая форма). Опоясывающий герпес у беременной не представляет опасности для плода. 

В соответствии с клиническими рекомендациями диагностика ветряной оспы и опоясывающего герпеса чаще всего основывается на клинической картине заболевания. Лабораторные методы исследования в медицинских организациях используются для диагностики атипичных и стертых форм заболевания, для проведения дифференциальной диагностики с другими заболеваниями, сопровождающимися везикулезной сыпью (например, инфекцией, вызванной вирусом простого герпеса, ящуром, энтеровирусной инфекцией, стрептодермией). 

Согласно международным рекомендациям лабораторное подтверждение ветряной оспы или опоясывающего герпеса происходит путем обнаружения ДНК VZV методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или при выделении VZV в культуре клеток в биологическом материале. Обнаружение VZV-специфического сывороточного IgM (тест № 

257

) менее чувствительно, чем ПЦР, и не является методом выбора для подтверждения ветряной оспы. Серологический скрининг сыворотки на предмет обнаружения IgG (тест № 

256

) может быть использован для оценки иммунитета или восприимчивости к ветряной оспе у невакцинированных лиц.

Аналитические показатели 

  • определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК вируса Varicella-Zoster; 
  • специфичность определения – 100%; 
  • чувствительность определения – 100 копий ДНК возбудителя в образце.

Литература

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Исследуемый материал
Мазок со слизистой носоглотки и/или ротоглотки

В случае получения положительного или сомнительного результата на COVID-19 и при необходимости проведения подтверждающего тестирования образец биоматериала может быть направлен в уполномоченную референс-лабораторию в соответствии с СП 3.1.3597-20, в связи с чем установленный срок выполнения исследования может быть увеличен.

Синонимы: Ковид-19; Новая коронавирусная инфекция; РНК нового коронавируса; РНК SARS-CoV-2 в мазке со слизистой носоглотки и/или ротоглотки. 

Comprehensive laboratory diagnosis of coronavirus COVID-19; New Coronavirus RNA in nasopharyngeal and/or oropharyngeal smear.

Краткая информация об инфекции, вызываемой вирусом SARS-CoV-2 (COVID-19) 

SARS-CoV-2 относится к большому семейству РНК-содержащих вирусов – коронавирусов (лат. Coronaviridae), вызывающих респираторные заболевания. В настоящее время известно о циркуляции среди населения четырех видов коронавирусов (HCoV-229E, -OC43, -NL63 и -HKU1), которые круглогодично присутствуют в структуре ОРВИ и, как правило, вызывают поражение верхних дыхательных путей легкой и средней тяжести. К семейству коронавирусов также относятся опасные вирусы SARS-CoV и MERS-CoV, вызывающие тяжелый острый респираторный синдром и ближневосточный респираторный синдром, соответственно. 

Основным источником при инфицировании вирусом SARS-CoV-2 является больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания. В настоящее время считается, что инфекция передается воздушно-капельным (при кашле, чихании, разговоре), воздушно-пылевым и контактным путями. При этом факторами передачи могут быть воздух, пищевые продукты и предметы обихода, контаминированные SARS-CoV-2. 

Инкубационный период составляет от 2 до 14 суток. 

У большинства людей (до 80% случаев) инфекция протекает бессимптомно или в легкой форме, у 10-15% – в среднетяжелой форме, крайне тяжелое течение отмечается у 2-5% инфицированных. 

Диагноз заболевания, которому присвоено название COVID-19 и причиной которого является вирус SARS-CoV-2, устанавливается на основании клинического обследования, данных эпидемиологического анамнеза и результатов лабораторных исследований. 

Для заболевания характерно наличие клинических проявлений острой респираторной вирусной инфекции. Основными симптомами являются повышение температуры, кашель сухой или с небольшим количеством мокроты, одышка, миалгия и утомление, ощущение заложенности в грудной клетке. На раннем этапе заболевания COVID-19 возможны диарея, тошнота, рвота. Различают легкую, среднюю и тяжелую формы инфекции SARS-CoV-2. Тяжелая форма заболевания протекает как пневмония с острой дыхательной недостаточностью, острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), сепсис. 

Читайте также:  Шампунь при дерматите кожи головы у детей

Тестирование методом ПЦР в режиме реального времени применяют для специфической лабораторной диагностики, подтверждающей инфекцию SARS-CoV-2.

Аналитические характеристики теста «Коронавирус SARS-CoV-2, определение РНК, кач., в мазке со слизистой носоглотки и/или ротоглотки» 

Аналитическая чувствительность 

1×103 копий/мл исходного образца. 

Аналитическая специфичность 

Перекрестных реакций с вирусами (грипп А и В, парагрипп, аденовирусная инфекция, респираторно-синцитиальная инфекция, метапневмовирусная инфекция, риновирусная инфекция и коронавирусная инфекция человека, вызванная HCoV-NL63, HCoV-OC43, HCoV-229E, HCoV-HKU1) и микроорганизмами (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus) не обнаружено.

Источник

Метод определения
Микроскопия

Исследуемый материал
Смотрите в описании

Краткая характеристика Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму 

Бактериоскопия (от лат. «скопео» – смотрю) – лабораторный метод исследования бактерий под микроскопом. Метод широко используется врачами разных специальностей при подозрении на инфекционный процесс и наличии гнойно-воспалительных проявлений заболевания, а также при диспансерных обследованиях в гинекологической и акушерской практике.  

При микроскопии в мазках можно обнаружить бактерии, грибы (при кандидозе), простейшие (при трихомониазе). Важными моментами при проведении исследования являются оценка морфологии, т. е. формы бактерий, их размеров и расположения. Важными также являются количество (от скудного до массивного) и отношение к красителям (грамположительные и грамотрицательные клетки).  

Нормальной флорой при исследовании гинекологических мазков являются грамположительные палочки, которые в результате описываются как лактоморфотипы. При бактериальном вагинозе микробная флора представлена обильной мелкой коккобациллярной грамвариабельной флорой и характеризуется снижением лактоморфотипов. При гонорее в мазке присутствуют грамотрицательные кокки бобовидной формы, расположенные парами внутри и внеклеточно. При других гнойно-воспалительных состояниях (неспецифических) могут встречаться грамположительные кокки, грамотрицательные палочки. В мазках учитываются также наличие эпителия, присутствие ключевых клеток и количество лейкоцитов. 

В мокроте имеют значение грамположительные кокки, слегка вытянутые, в капсуле, расположенные парами, морфологически сходные с пневмококками, или мелкие неодинаковой формы грамотрицательные палочки, сходные с гемофилами, а также грамотрицательные кокки, расположенные поодиночке, что может говорить в пользу наличия бранхамелл.  

В мазках из ран чаще всего встречаются грамположительные кокки. 

Однако с помощью микроскопического исследования нет возможности дать заключение о названии бактерий. Для определения рода и вида бактерий требуется проведение бактериологического посева. 

С какой целью проводят Микроскопическое исследование мазка, окрашенного по Граму

Микроскопическое исследование окрашенного нативного мазка проводят при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовых путей; легких; ЛОР-органов; глаз; кожи, мягких тканей и др. Возможно применение данного теста в качестве дополнительного исследования к посевам на анаэробную инфекцию.  

Что может повлиять на результат теста «Микроскопическое исследование мазка, окрашенного по Граму»  

Не рекомендуется брать биологический материал для цитологического, бактериологического и ПЦР-исследований в один день!

Материал для исследования: 

– гинекологические мазки у женщин (материалом служат отделяемое наружных половых органов, уретры, влагалища, шейки матки, полости матки);  

– у мужчин исследуют соскоб из уретры, сперму, секрет предстательной железы (семенная жидкость); 

– материалом для мазков другой локализации могут служить мокрота, плевральная, перитонеальная, суставная и др. жидкости, раневое отделяемое, гной, мазки из зева, уха, отделяемого глаза и др.

Литература

Основная литература 

  1. Энциклопедия клинических лабораторных тестов под ред. Н.У. Тица. — М.: Изд. «Лабинформ». 1997:942. 
  2. Gobernado M. et al. Bacterial identification methods. Enferm. Infecc. Microbiol. Clin. 2003;21(2):6-13.

Источник